Protocols

Western Blot; Buffer de Lisis; Reactivos Relacionados con la Electroforesis; SDS-PAGE

La Western blotting es un método inmunológico ampliamente utilizado para detectar proteínas específicas en mezclas complejas. Combina el poder de separación de la electroforesis en gel con la especificidad de los anticuerpos. El proceso comienza con la extracción de proteínas de células o tejidos, seguido de la separación por SDS-PAGE según el peso molecular. Las proteínas se transfieren luego a una membrana (típicamente nitrocelulosa o PVDF) y se detectan mediante anticuerpos específicos. El anticuerpo primario se une a la proteína objetivo, mientras que el anticuerpo secundario, conjugado a una enzima reportera, permite la visualización mediante detección quimioluminiscente, fluorescente o colorimétrica.

Western Blotting (también llamado inmunoblotting) es una técnica utilizada para el análisis de proteínas individuales en una mezcla de proteínas (por ejemplo, un lisado celular). En Western Blotting (inmunoblotting), la mezcla de proteínas se aplica a una electroforesis en gel en una matriz portadora (SDS-PAGE, PAGE nativo, focalización isoeléctrica, electroforesis en gel 2D, etc.) para clasificar las proteínas por tamaño, carga u otras diferencias en bandas de proteínas individuales.