Name: Kit ELISA de OPN (osteopontina) humana
Brand: Enkilife Limited
SKU: EH10253

Kit ELISA de OPN (osteopontina) humana

CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES

Nombre completo	Osteopontina
Sinónimo	SPP1;BNSP;BSP1;ETA-1;Bone Sialoprotein I;Secreted Phosphoprotein 1;Early T-Lymphocyte Activation 1;
Tipo de ensayo	Sándwich
Reactividad	Humano
Rango	0.31-20ng/mL
Sensibilidad	0.19ng/mL
Tipo de muestra	Suero, plasma y otros fluidos biológicos
Volumen de muestra	100μL
Longitud de onda de detección	OD450
Temperatura de transporte	2-8°C
Especificidad	El kit detectó OPN humana en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies.
Microplaca	96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip

PRINCIPIO DEL ENSAYO

Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para OPN Humana. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para OPN Humana y un conjugado de Avidina-Peroxidasa de Rábano Picante (HRP) se añaden sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen OPN Humana, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de Avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de OPN Humana. Puede calcular la concentración de OPN Humana en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar.

COMPONENTES DEL KIT ELISA

Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.

Componentes	Especificaciones	Almacenamiento y notas
Microplaca	96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips	No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C.
Estándar de referencia	96T: 2 vials 48T: 1 vial	No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución.
Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×)	96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial	No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo.
Concentrado de conjugado HRP (100×)	96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial	No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo.
Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado	14mL×1	2-8℃, 12 meses
Diluyente de conjugado HRP	14mL×1	2-8℃, 12 meses
Diluyente de estándar de referencia y muestra	20mL×1	2-8℃, 12 meses
Concentrado de tampón de lavado (25×)	30mL×1	2-8℃, 12 meses
Reactivo sustrato (TMB)	10mL×1	2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses
Solución de parada	7mL×1	2-8°C/Temperatura ambiente

PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO

DATOS TÍPICOS

Humano OPN Curva estándar ELISA

Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.

PRECISIÓN

Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.

Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.

	Precisión intra-ensayo			Precisión inter-ensayo
Muestra	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Media (ng/mL)	0.97	2.11	7.17	0.95	2.03	7.81
Desviación estándar	0.06	0.09	0.29	0.05	0.11	0.37
CV(%)	5.89	4.22	4.02	5.34	5.31	4.77

RECUPERACIÓN

Se evaluó la recuperación de Humano OPN adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.

Tipo de muestra	Rango (%)	Recuperación promedio (%)
Suero(n=8)	92-106	97
Plasma EDTA (n=8)	91-106	98
Medio de cultivo celular (n=8)	94-110	100

LINEALIDAD

Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Humano OPN en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.

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