Name: Kit ELISA para HIF-1α (factor inducible por hipoxia 1 alfa) humano
Brand: Enkilife Limited
SKU: EH10090

Kit ELISA para HIF-1α (factor inducible por hipoxia 1 alfa) humano

CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES

Nombre completo	Factor inducible por hipoxia 1 alfa
Sinónimo	HIF1A;HIF-1A;MOP1;PASD8;bHLHe78;basic helix-loop-helix transcription factor;
Tipo de ensayo	Sándwich
Reactividad	Humano
Rango	62.5-4000pg/mL
Sensibilidad	37.5pg/mL
Tipo de muestra	Suero, plasma y otros fluidos biológicos
Volumen de muestra	100μL
Longitud de onda de detección	OD450
Temperatura de transporte	2-8°C
Especificidad	El kit detectó HIF-1α humano en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies.
Microplaca	96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip

PRINCIPIO DEL ENSAYO

Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para HIF-1α humano. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para HIF-1α humano y un conjugado de avidina-peroxidasa de rábano picante (HRP) se añaden sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen HIF-1α humano, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de HIF-1α humano. Puede calcular la concentración de HIF-1α humano en las muestras comparando la OD de las muestras con la curva estándar.

COMPONENTES DEL KIT ELISA

Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.

Componentes	Especificaciones	Almacenamiento y notas
Microplaca	96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips	No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C.
Estándar de referencia	96T: 2 vials 48T: 1 vial	No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución.
Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×)	96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial	No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo.
Concentrado de conjugado HRP (100×)	96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial	No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo.
Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado	14mL×1	2-8℃, 12 meses
Diluyente de conjugado HRP	14mL×1	2-8℃, 12 meses
Diluyente de estándar de referencia y muestra	20mL×1	2-8℃, 12 meses
Concentrado de tampón de lavado (25×)	30mL×1	2-8℃, 12 meses
Reactivo sustrato (TMB)	10mL×1	2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses
Solución de parada	7mL×1	2-8°C/Temperatura ambiente

PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO

DATOS TÍPICOS

Humano HIF-1α Curva estándar ELISA

Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.

PRECISIÓN

Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.

Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.

	Precisión intra-ensayo			Precisión inter-ensayo
Muestra	1	2	3	1	2	3
n	20	20	20	20	20	20
Media (pg/mL)	220.27	512.73	1511.71	202.89	474.45	1444.98
Desviación estándar	14.93	29.28	65.91	10.49	26.47	62.13
CV(%)	6.78	5.71	4.36	5.17	5.58	4.3

RECUPERACIÓN

Se evaluó la recuperación de Humano HIF-1α adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.

Tipo de muestra	Rango (%)	Recuperación promedio (%)
Suero(n=8)	91-103	97
Plasma EDTA (n=8)	87-102	95
Medio de cultivo celular (n=8)	88-101	94

LINEALIDAD

Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Humano HIF-1α en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.

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