CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Clúster de diferenciación 4 |
|---|---|
| Sinónimo | CD4mut; p55; T-cell surface glycoprotein CD4; T-cell surface antigen T4/Leu-3 |
| Tipo de ensayo | Sándwich |
| Reactividad | Humano |
| Rango | 0.15-10ng/mL |
| Sensibilidad | 0.07ng/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 100μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó CD4 humano en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para CD4 Humano. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para CD4 Humano y un conjugado de Avidina-Peroxidasa de Rábano Picante (HRP) se añaden sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen CD4 Humano, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de Avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de CD4 Humano. Puede calcular la concentración de CD4 Humano en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO
DATOS TÍPICOS
Humano CD4 Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (ng/mL) | 0.52 | 1.3 | 3.7 | 0.49 | 1.2 | 3.61 |
| Desviación estándar | 0.03 | 0.08 | 0.15 | 0.03 | 0.07 | 0.19 |
| CV(%) | 5.35 | 5.86 | 3.97 | 6.81 | 5.89 | 5.36 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Humano CD4 adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 90-103 | 96 |
| Plasma EDTA (n=8) | 94-105 | 99 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 88-100 | 94 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Humano CD4 en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Pathways associated with ELISA Kit
| Adaptive Immune System Pathway | Adaptive Immune System Pathway |
| Alpha-defensins Pathway | Alpha-defensins Pathway |
| Antigen Processing And Presentation Pathway | Antigen Processing And Presentation Pathway |
| Arf1 Pathway | Arf1 Pathway |
| Binding And Entry Of HIV Virion Pathway | Binding And Entry Of HIV Virion Pathway |
| C-MYB Transcription Factor Network Pathway | C-MYB Transcription Factor Network Pathway |
| CXCR4-mediated Signaling Events Pathway | CXCR4-mediated Signaling Events Pathway |
| Cell Adhesion Molecules (CAMs) Pathway | Cell Adhesion Molecules (CAMs) Pathway |
Organs/Tissues associated with CD4 ELISA Kit
| Blood | publications with CD4 and Blood |
| Spleen | publications with CD4 and Spleen |
| Lymph Node | publications with CD4 and Lymph Node |
| Thymus | publications with CD4 and Thymus |
| Bone | publications with CD4 and Bone |
| Lung | publications with CD4 and Lung |
| Bone Marrow | publications with CD4 and Bone Marrow |
| Liver | publications with CD4 and Liver |
| Intestine | publications with CD4 and Intestine |
| Brain | publications with CD4 and Brain |
