CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Proteína bactericida/que aumenta la permeabilidad |
|---|---|
| Sinónimo | CAP 57 |
| Tipo de ensayo | Sándwich |
| Reactividad | Humano |
| Rango | 12.5-800pg/mL |
| Sensibilidad | 4.9pg/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 100μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó BPI humano en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para BPI humana. Los estándares o muestras se agregan a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para BPI humana y un conjugado de avidina-peroxidasa de rábano picante (HRP) se agregan sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se agrega a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen BPI humana, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza con la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de BPI humana. Puede calcular la concentración de BPI humana en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO
DATOS TÍPICOS
Humano BPI Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (pg/mL) | 37.3 | 118.08 | 330.97 | 35.44 | 119.69 | 304.57 |
| Desviación estándar | 1.98 | 5.01 | 15.99 | 2.19 | 6.5 | 9.59 |
| CV(%) | 5.31 | 4.24 | 4.83 | 6.18 | 5.43 | 3.15 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Humano BPI adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 94-108 | 99 |
| Plasma EDTA (n=8) | 94-108 | 100 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 92-104 | 99 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Humano BPI en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Products associated with LBP ELISA Kits
| CD14 ELISA Kit | publications with LBP and CD14 |
| JUN ELISA Kit | publications with LBP and JUN |
| TLR4 ELISA Kit | publications with LBP and TLR4 |
| LY96 ELISA Kit | publications with LBP and LY96 |
| CAMP ELISA Kit | publications with LBP and CAMP |
| FOS ELISA Kit | publications with LBP and FOS |
| STAT3 ELISA Kit | publications with LBP and STAT3 |
Pathways associated with LBP ELISA Kit
| IL6-mediated Signaling Events Pathway | IL6-mediated Signaling Events Pathway |
| Immune System Pathway | Immune System Pathway |
| Innate Immune System Pathway | Innate Immune System Pathway |
| NF-kappa B Signaling Pathway | NF-kappa B Signaling Pathway |
| Regulation Of Toll-like Receptor Signaling Pathway | Regulation Of Toll-like Receptor Signaling Pathway |
| Salmonella Infection Pathway | Salmonella Infection Pathway |
| Toll Like Receptor 4 (TLR4) Cascade Pathway | Toll Like Receptor 4 (TLR4) Cascade Pathway |
| Toll-Like Receptors Cascades Pathway | Toll-Like Receptors Cascades Pathway |
| Toll-like Receptor Signaling Pathway | Toll-like Receptor Signaling Pathway |
Diseases associated with LBP ELISA Kit
| Pain | publications with LBP and Pain |
| Nervous System Diseases | publications with LBP and Nervous System Diseases |
| Inflammation | publications with LBP and Inflammation |
| Necrosis | publications with LBP and Necrosis |
| Sepsis | publications with LBP and Sepsis |
| Cardiovascular Diseases | publications with LBP and Cardiovascular Diseases |
| Liver Diseases | publications with LBP and Liver Diseases |
| Obesity | publications with LBP and Obesity |
| Carcinoma | publications with LBP and Carcinoma |
| Brain Diseases | publications with LBP and Brain Diseases |
Organs/Tissues associated with LBP ELISA Kit
| Blood | publications with LBP and Blood |
| Muscle | publications with LBP and Muscle |
| Liver | publications with LBP and Liver |
| Brain | publications with LBP and Brain |
| Heart | publications with LBP and Heart |
| Connective Tissue | publications with LBP and Connective Tissue |
| Salivary Gland | publications with LBP and Salivary Gland |
| Prostate | publications with LBP and Prostate |
| Pancreas | publications with LBP and Pancreas |
