CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Proteína quinasa, alfa 1 activada por AMP |
|---|---|
| Sinónimo | PRKAa1; AMPK; AMPKa1; PKA; ACACA kinase; 5'-AMP-Activated Protein Kinase Catalytic Subunit Alpha-1; Acetyl-CoA carboxylase kinase; Hydroxymethylglutaryl-CoA reductase kinase |
| Tipo de ensayo | Sándwich |
| Reactividad | Ratón |
| Rango | 1.56-100ng/mL |
| Sensibilidad | 0.57ng/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 100μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó AMPKAlpha1 de ratón en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para AMPKAlpha1 de ratón. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. A continuación, se añaden sucesivamente un anticuerpo de detección biotinilado específico para AMPKAlpha1 de ratón y un conjugado de avidina-peroxidasa de rábano picante (HRP) a cada pocillo de la microplaca y se incuba. Los componentes libres se eliminan por lavado. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen AMPKAlpha1 de ratón, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de AMPKAlpha1 de ratón. Puede calcular la concentración de AMPKAlpha1 de ratón en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO
DATOS TÍPICOS
Ratón AMPKAlpha1 Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (ng/mL) | 4.75 | 13.51 | 46.24 | 4.29 | 12.94 | 43.5 |
| Desviación estándar | 0.29 | 0.69 | 1.79 | 0.24 | 0.65 | 1.87 |
| CV(%) | 6.16 | 5.12 | 3.88 | 5.55 | 5.02 | 4.29 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Ratón AMPKAlpha1 adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 91-107 | 98 |
| Plasma EDTA (n=8) | 95-107 | 102 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 95-107 | 101 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Ratón AMPKAlpha1 en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Products associated with Prkaa1 ELISA Kits
| Stk11 ELISA Kit | publications with Prkaa1 and Stk11 |
| Prkag1 ELISA Kit | publications with Prkaa1 and Prkag1 |
| Prkab2 ELISA Kit | publications with Prkaa1 and Prkab2 |
| Prkab1 ELISA Kit | publications with Prkaa1 and Prkab1 |
| Prkag3 ELISA Kit | publications with Prkaa1 and Prkag3 |
| Prkag2 ELISA Kit | publications with Prkaa1 and Prkag2 |
| Acaca ELISA Kit | publications with Prkaa1 and Acaca |
| Tsc2 ELISA Kit | publications with Prkaa1 and Tsc2 |
| Acacb ELISA Kit | publications with Prkaa1 and Acacb |
Pathways associated with Prkaa1 ELISA Kit
| AMPK Signaling Pathway | AMPK Signaling Pathway |
| Adipocytokine Signaling Pathway | Adipocytokine Signaling Pathway |
| Cellular Responses To Stress Pathway | Cellular Responses To Stress Pathway |
| Circadian Rhythm Pathway | Circadian Rhythm Pathway |
| Energy Dependent Regulation Of MTOR By LKB1-AMPK Pathway | Energy Dependent Regulation Of MTOR By LKB1-AMPK Pathway |
| FoxO Signaling Pathway | FoxO Signaling Pathway |
| Gene Expression Pathway | Gene Expression Pathway |
Diseases associated with Prkaa1 ELISA Kit
| Inflammation | publications with Prkaa1 and Inflammation |
| Cardiovascular Diseases | publications with Prkaa1 and Cardiovascular Diseases |
| Fatty Liver | publications with Prkaa1 and Fatty Liver |
| Heart Diseases | publications with Prkaa1 and Heart Diseases |
| Necrosis | publications with Prkaa1 and Necrosis |
| Nervous System Diseases | publications with Prkaa1 and Nervous System Diseases |
| Insulin Resistance | publications with Prkaa1 and Insulin Resistance |
| Liver Diseases | publications with Prkaa1 and Liver Diseases |
| Stomach Neoplasms | publications with Prkaa1 and Stomach Neoplasms |
| Disease Models, Animal | publications with Prkaa1 and Disease Models, Animal |
Organs/Tissues associated with Prkaa1 ELISA Kit
| Muscle | publications with Prkaa1 and Muscle |
| Liver | publications with Prkaa1 and Liver |
| Heart | publications with Prkaa1 and Heart |
| Brain | publications with Prkaa1 and Brain |
| Lung | publications with Prkaa1 and Lung |
| Connective Tissue | publications with Prkaa1 and Connective Tissue |
| Pancreas | publications with Prkaa1 and Pancreas |
| Bone | publications with Prkaa1 and Bone |
| Eye | publications with Prkaa1 and Eye |
| Embryonic Tissue | publications with Prkaa1 and Embryonic Tissue |
