CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Polipéptido de fosfoinosítido-3-quinasa de clase 2 alfa |
|---|---|
| Sinónimo | PI3K2a; CPK; PI3-K-C2(Alpha); PI3-K-C2A; PI3K2-a; Phosphoinositide 3-Kinase 2a; Phosphatidylinositol 4-phosphate 3-kinase C2 domain-containing subunit alpha |
| Tipo de ensayo | Sándwich |
| Reactividad | Ratón |
| Rango | 0.15-10ng/mL |
| Sensibilidad | 0.06ng/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 100μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó PIK3C2a de ratón en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para PIK3C2a de ratón. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para PIK3C2a de ratón y un conjugado de avidina-peroxidasa de rábano picante (HRP) se añaden sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen PIK3C2a de ratón, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de PIK3C2a de ratón. Puede calcular la concentración de PIK3C2a de ratón en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO
DATOS TÍPICOS
Ratón PIK3C2a Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (ng/mL) | 0.5 | 1.45 | 4.76 | 0.45 | 1.37 | 5.22 |
| Desviación estándar | 0.03 | 0.08 | 0.14 | 0.03 | 0.07 | 0.25 |
| CV(%) | 5.29 | 5.4 | 3.04 | 6.71 | 4.82 | 4.78 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Ratón PIK3C2a adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 94-108 | 100 |
| Plasma EDTA (n=8) | 95-110 | 101 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 88-104 | 96 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Ratón PIK3C2a en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Pathways associated with ELISA Kit
| Clathrin Derived Vesicle Budding Pathway | Clathrin Derived Vesicle Budding Pathway |
| Golgi Associated Vesicle Biogenesis Pathway | Golgi Associated Vesicle Biogenesis Pathway |
| Inositol Phosphate Metabolism Pathway | Inositol Phosphate Metabolism Pathway |
| Insulin Signaling Pathway | Insulin Signaling Pathway |
| Membrane Trafficking Pathway | Membrane Trafficking Pathway |
| Phosphatidylinositol Signaling System Pathway | Phosphatidylinositol Signaling System Pathway |
| Regulation Of Actin Cytoskeleton Pathway | Regulation Of Actin Cytoskeleton Pathway |
| Trans-Golgi Network Vesicle Budding Pathway | Trans-Golgi Network Vesicle Budding Pathway |
Diseases associated with PIK3C2A ELISA Kit
| Depressive Disorder | publications with PIK3C2A and Depressive Disorder |
| Renal Insufficiency | publications with PIK3C2A and Renal Insufficiency |
| Neoplasm Metastasis | publications with PIK3C2A and Neoplasm Metastasis |
| Breast Neoplasms | publications with PIK3C2A and Breast Neoplasms |
| Prostatic Neoplasms | publications with PIK3C2A and Prostatic Neoplasms |
| Kidney Diseases | publications with PIK3C2A and Kidney Diseases |
| Prostatic Diseases | publications with PIK3C2A and Prostatic Diseases |
Organs/Tissues associated with PIK3C2A ELISA Kit
| Brain | publications with PIK3C2A and Brain |
| Prostate | publications with PIK3C2A and Prostate |
| Bone | publications with PIK3C2A and Bone |
| Bone Marrow | publications with PIK3C2A and Bone Marrow |
| Ovary | publications with PIK3C2A and Ovary |
| Kidney | publications with PIK3C2A and Kidney |
| Pancreas | publications with PIK3C2A and Pancreas |
