CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Proteína plasmática A asociada al embarazo |
|---|---|
| Sinónimo | PAPP-A; PAPA; ASBABP2; DIPLA1; IGFBP-4ase; PAPPA1; Pappalysin 1; Insulin-Like Growth Factor Binding Protein-4 Protease; Differentially Placenta 1 Expressed Protein |
| Tipo de ensayo | Sándwich |
| Reactividad | Ratón |
| Rango | 78-5000pg/mL |
| Sensibilidad | 29pg/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 100μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó PAPPA de ratón en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para PAPPA de Ratón. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para PAPPA de Ratón y un conjugado de Avidina-Peroxidasa de Rábano Picante (HRP) se añaden sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen PAPPA de Ratón, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de Avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de PAPPA de Ratón. Puede calcular la concentración de PAPPA de Ratón en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO
DATOS TÍPICOS
Ratón PAPPA Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (pg/mL) | 268.9 | 730.07 | 1951.12 | 263.03 | 766.8 | 1873.61 |
| Desviación estándar | 15.68 | 37.67 | 65.56 | 17.04 | 32.28 | 88.81 |
| CV(%) | 5.83 | 5.16 | 3.36 | 6.48 | 4.21 | 4.74 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Ratón PAPPA adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 84-98 | 90 |
| Plasma EDTA (n=8) | 88-103 | 94 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 89-104 | 95 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Ratón PAPPA en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Products associated with PAPPA ELISA Kits
| Igf1 ELISA Kit | publications with PAPPA and Igf1 |
| Igfbp4 ELISA Kit | publications with PAPPA and Igfbp4 |
| Igf2 ELISA Kit | publications with PAPPA and Igf2 |
| Igfbp5 ELISA Kit | publications with PAPPA and Igfbp5 |
| Pparg ELISA Kit | publications with PAPPA and Pparg |
| Trp53 ELISA Kit | publications with PAPPA and Trp53 |
| Prg2 ELISA Kit | publications with PAPPA and Prg2 |
Pathways associated with PAPPA ELISA Kit
| Metabolism Of Proteins Pathway | Metabolism Of Proteins Pathway |
| Regulation Of Insulin-like Growth Factor (IGF) Transport And Uptake By Insulin-like Growth Factor Binding Proteins (IGFBPs) Pathway | Regulation Of Insulin-like Growth Factor (IGF) Transport And Uptake By Insulin-like Growth Factor Binding Proteins (IGFBPs) Pathway |
Organs/Tissues associated with PAPPA ELISA Kit
| Liver | publications with PAPPA and Liver |
| Eye | publications with PAPPA and Eye |
| Lung | publications with PAPPA and Lung |
| Embryonic Tissue | publications with PAPPA and Embryonic Tissue |
| Thymus | publications with PAPPA and Thymus |
