Kit ELISA de GaA (glucosidasa alfa ácida) de ratón

Kit ELISA de GaA (glucosidasa alfa ácida) de ratón

Cat: EM23064
Rango de ensayo: 31.2-2000pg/mL
Sensibilidad: 11.4pg/mL
Tamaño: 96T Precio: $520
Tamaño: 48T Precio: $416
Category: ELISA Kits Tags: ,

CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES

Nombre completoGlucosidasa alfa, ácida
SinónimoLYAG; Acid Alpha-Glucosidase; Lysosomal Alpha-Glucosidase; Pompe Disease Glycogen Storage Disease Type II; Acid Maltase; Aglucosidase Alfa
Tipo de ensayoSándwich
ReactividadRatón
Rango31.2-2000pg/mL
Sensibilidad11.4pg/mL
Tipo de muestraSuero, plasma y otros fluidos biológicos
Volumen de muestra100μL
Longitud de onda de detecciónOD450
Temperatura de transporte2-8°C
EspecificidadEl kit detectó GaA de ratón en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies.
Microplaca96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip

PRINCIPIO DEL ENSAYO

Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para GaA de ratón. Los estándares o muestras se agregan a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para GaA de ratón y un conjugado de avidina-peroxidasa de rábano picante (HRP) se agregan sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se agrega a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen GaA de ratón, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza con la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de GaA de ratón. Puede calcular la concentración de GaA de ratón en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar.

COMPONENTES DEL KIT ELISA

Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.

ComponentesEspecificacionesAlmacenamiento y notas
Microplaca
96T: 8 wells×12 strips
48T: 8 wells×6 strips
No abierto: -20°C, 12 meses
No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C.
Estándar de referencia
96T: 2 vials
48T: 1 vial
No abierto: -20°C, 12 meses
Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución.
Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×)
96T: 120μL×1 vial
48T: 60μL×1 vial
No abierto: -20°C, 12 meses
No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo.
Concentrado de conjugado HRP (100×)
96T: 120μL×1 vial
48T: 60μL×1 vial
No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses
No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo.
Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado
14mL×1
2-8℃, 12 meses
Diluyente de conjugado HRP
14mL×1
2-8℃, 12 meses
Diluyente de estándar de referencia y muestra20mL×1
2-8℃, 12 meses
Concentrado de tampón de lavado (25×)30mL×1
2-8℃, 12 meses
Reactivo sustrato (TMB)10mL×12-8°C (Proteger de la luz), 12 meses
Solución de parada7mL×12-8°C/Temperatura ambiente

PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO

DATOS TÍPICOS

 Standard Curve Image

Ratón GaA Curva estándar ELISA

Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.

PRECISIÓN

Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.

Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.

Precisión intra-ensayoPrecisión inter-ensayo
Muestra123123
n202020202020
Media (pg/mL)105.43181.5854.6699.47196.31780.87
Desviación estándar7.0410.6730.345.559.7634.05
CV(%)6.685.883.555.584.974.36

RECUPERACIÓN

Se evaluó la recuperación de Ratón GaA adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.

Tipo de muestraRango (%)Recuperación promedio (%)
Suero(n=8)93-10899
Plasma EDTA (n=8)84-9890
Medio de cultivo celular (n=8)88-10195

LINEALIDAD

Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Ratón GaA en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.

Pathways associated with GaA ELISA Kit

Galactose Metabolism Pathway Galactose Metabolism Pathway
Lysosome Pathway Lysosome Pathway
Metabolic Pathways Metabolic Pathways
Notch-mediated HES/HEY Network Pathway Notch-mediated HES/HEY Network Pathway
Starch And Sucrose Metabolism Pathway Starch And Sucrose Metabolism Pathway
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