CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Objetivo de la rapamicina en mamíferos |
|---|---|
| Sinónimo | FRAP; FRAP1; FRAP2; MTOR; RAFT1; RAPT1; FK506 Binding Protein 12 Rapamycin Associated Protein; Mammalian Target Of Rapamycin; FKBP12-Rapamycin Complex-Associated Protein 1; Rapamycin and FKBP12 target |
| Tipo de ensayo | Sándwich |
| Reactividad | Humano |
| Rango | 0.31-20ng/mL |
| Sensibilidad | 0.12ng/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 100μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó mTOR humano en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para mTOR humano. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para mTOR humano y un conjugado de avidina-peroxidasa de rábano picante (HRP) se añaden sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen mTOR humano, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de mTOR humano. Puede calcular la concentración de mTOR humano en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO

DATOS TÍPICOS

Humano mTOR Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (ng/mL) | 0.94 | 3.13 | 9.54 | 0.91 | 3.22 | 10.35 |
| Desviación estándar | 0.05 | 0.17 | 0.51 | 0.05 | 0.17 | 0.35 |
| CV(%) | 5.84 | 5.32 | 5.33 | 5.36 | 5.17 | 3.39 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Humano mTOR adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 86-100 | 91 |
| Plasma EDTA (n=8) | 90-106 | 97 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 96-108 | 102 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Humano mTOR en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Pathways associated with ELISA Kit
| Adaptive Immune System Pathway | Adaptive Immune System Pathway |
| CD28 Co-stimulation Pathway | CD28 Co-stimulation Pathway |
| CD28 Dependent PI3K/Akt Signaling Pathway | CD28 Dependent PI3K/Akt Signaling Pathway |
| Constitutive PI3K/AKT Signaling In Cancer Pathway | Constitutive PI3K/AKT Signaling In Cancer Pathway |
| Costimulation By The CD28 Family Pathway | Costimulation By The CD28 Family Pathway |
| DAP12 Interactions Pathway | DAP12 Interactions Pathway |
| DAP12 Signaling Pathway | DAP12 Signaling Pathway |
| Disease Pathway | Disease Pathway |
| Downstream Signaling Events Of B Cell Receptor (BCR) Pathway | Downstream Signaling Events Of B Cell Receptor (BCR) Pathway |
| Downstream Signal Transduction Pathway | Downstream Signal Transduction Pathway |
Diseases associated with PIA ELISA Kit
| Neoplasms | publications with PIA and Neoplasms |
| Insulin Resistance | publications with PIA and Insulin Resistance |
| Breast Neoplasms | publications with PIA and Breast Neoplasms |
| Neoplasms, Experimental | publications with PIA and Neoplasms, Experimental |
| Kidney Diseases | publications with PIA and Kidney Diseases |
| Neoplasm Invasiveness | publications with PIA and Neoplasm Invasiveness |
| Hypertrophy | publications with PIA and Hypertrophy |
| Adenocarcinoma | publications with PIA and Adenocarcinoma |
| Necrosis | publications with PIA and Necrosis |
| Inflammation | publications with PIA and Inflammation |
Organs/Tissues associated with PIA ELISA Kit
| Kidney | publications with PIA and Kidney |
| Brain | publications with PIA and Brain |
| Bone | publications with PIA and Bone |
| Adipose Tissue | publications with PIA and Adipose Tissue |
| Bone Marrow | publications with PIA and Bone Marrow |
| Skin | publications with PIA and Skin |
| Heart | publications with PIA and Heart |
| Lung | publications with PIA and Lung |
| Lymph Node | publications with PIA and Lymph Node |
| Pancreas | publications with PIA and Pancreas |