CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Óxido nítrico sintasa 3, endotelial |
|---|---|
| Sinónimo | ECNOS;NOS III;E-NOS; |
| Tipo de ensayo | Sándwich |
| Reactividad | Humano |
| Rango | 62.5-4000pg/mL |
| Sensibilidad | 37.5pg/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 100μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó NOS3/eNOS humana en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para NOS3/eNOS humana. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para NOS3/eNOS humana y un conjugado de avidina-peroxidasa de rábano picante (HRP) se añaden sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen NOS3/eNOS humana, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de NOS3/eNOS humana. Puede calcular la concentración de NOS3/eNOS humana en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO
DATOS TÍPICOS
Humano NOS3/eNOS Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (pg/mL) | 185.07 | 391.07 | 1507.3 | 174.04 | 403.85 | 1483.99 |
| Desviación estándar | 12.23 | 18.54 | 63.61 | 9.35 | 22.29 | 53.42 |
| CV(%) | 6.61 | 4.74 | 4.22 | 5.37 | 5.52 | 3.6 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Humano NOS3/eNOS adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 88-100 | 93 |
| Plasma EDTA (n=8) | 87-101 | 92 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 88-101 | 94 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Humano NOS3/eNOS en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Pathways associated with ELISA Kit
| ACE Inhibitor Pathway | ACE Inhibitor Pathway |
| AGE/RAGE Pathway | AGE/RAGE Pathway |
| Angiogenesis Pathway | Angiogenesis Pathway |
| Angiopoietin Receptor Tie2-mediated Signaling Pathway | Angiopoietin Receptor Tie2-mediated Signaling Pathway |
| Arginine And Proline Metabolism Pathway | Arginine And Proline Metabolism Pathway |
| Calcium Signaling Pathway | Calcium Signaling Pathway |
| Disease Pathway | Disease Pathway |
| Endothelin Pathway | Endothelin Pathway |
Diseases associated with NOS ELISA Kit
| Cardiovascular Diseases | publications with NOS and Cardiovascular Diseases |
| Hypertension | publications with NOS and Hypertension |
| Myocardial Ischemia | publications with NOS and Myocardial Ischemia |
| Ischemia | publications with NOS and Ischemia |
| Atherosclerosis | publications with NOS and Atherosclerosis |
| Coronary Artery Disease | publications with NOS and Coronary Artery Disease |
| Arteriosclerosis | publications with NOS and Arteriosclerosis |
| Reperfusion Injury | publications with NOS and Reperfusion Injury |
| Myocardial Infarction | publications with NOS and Myocardial Infarction |
| Neoplasms | publications with NOS and Neoplasms |
Organs/Tissues associated with NOS ELISA Kit
| Vascular | publications with NOS and Vascular |
| Blood | publications with NOS and Blood |
| Heart | publications with NOS and Heart |
| Kidney | publications with NOS and Kidney |
| Brain | publications with NOS and Brain |
| Lung | publications with NOS and Lung |
| Liver | publications with NOS and Liver |
| Embryonic Tissue | publications with NOS and Embryonic Tissue |
| Bone | publications with NOS and Bone |
| Skin | publications with NOS and Skin |
