CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Proteína tumoral p53 |
|---|---|
| Sinónimo | TP53; LFS1; TRP53; Li-Fraumeni Syndrome; Cellular tumor antigen p53; Antigen NY-CO-13; Phosphoprotein p53; Tumor suppressor p53 |
| Tipo de ensayo | Sándwich |
| Reactividad | Ratón |
| Rango | 78-5000pg/mL |
| Sensibilidad | 33pg/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 100μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó P53 de ratón en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para P53 de ratón. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para P53 de ratón y un conjugado de avidina-peroxidasa de rábano picante (HRP) se añaden sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen P53 de ratón, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de P53 de ratón. Puede calcular la concentración de P53 de ratón en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO
DATOS TÍPICOS
Ratón P53 Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (pg/mL) | 261.35 | 657.11 | 2269.92 | 259.74 | 632.31 | 2142.64 |
| Desviación estándar | 14.82 | 37.52 | 100.78 | 13.19 | 37.43 | 102.2 |
| CV(%) | 5.67 | 5.71 | 4.44 | 5.08 | 5.92 | 4.77 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Ratón P53 adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 96-107 | 101 |
| Plasma EDTA (n=8) | 89-105 | 96 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 86-100 | 93 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Ratón P53 en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Pathways associated with ELISA Kit
| Activated TLR4 Signalling Pathway | Activated TLR4 Signalling Pathway |
| Advanced Glycosylation Endproduct Receptor Signaling Pathway | Advanced Glycosylation Endproduct Receptor Signaling Pathway |
| Amyloids Pathway | Amyloids Pathway |
| Binding And Uptake Of Ligands By Scavenger Receptors Pathway | Binding And Uptake Of Ligands By Scavenger Receptors Pathway |
| Class A/1 (Rhodopsin-like Receptors) Pathway | Class A/1 (Rhodopsin-like Receptors) Pathway |
| Cytosolic Sensors Of Pathogen-associated DNA Pathway | Cytosolic Sensors Of Pathogen-associated DNA Pathway |
| DEx/H-box Helicases Activate Type I IFN And Inflammatory Cytokines Production Pathway | DEx/H-box Helicases Activate Type I IFN And Inflammatory Cytokines Production Pathway |
| Defective ACTH Causes Obesity And Pro-opiomelanocortinin Deficiency (POMCD) Pathway | Defective ACTH Causes Obesity And Pro-opiomelanocortinin Deficiency (POMCD) Pathway |
| Disease Pathway | Disease Pathway |
| Folate Metabolism Pathway | Folate Metabolism Pathway |
Diseases associated with SAA ELISA Kit
| Inflammation | publications with SAA and Inflammation |
| Necrosis | publications with SAA and Necrosis |
| Kidney Diseases | publications with SAA and Kidney Diseases |
| Liver Diseases | publications with SAA and Liver Diseases |
| Cardiovascular Diseases | publications with SAA and Cardiovascular Diseases |
| Disease Models, Animal | publications with SAA and Disease Models, Animal |
| Atherosclerosis | publications with SAA and Atherosclerosis |
| Liver Neoplasms | publications with SAA and Liver Neoplasms |
| Lung Diseases | publications with SAA and Lung Diseases |
| Carcinoma, Hepatocellular | publications with SAA and Carcinoma, Hepatocellular |
Organs/Tissues associated with SAA ELISA Kit
| Liver | publications with SAA and Liver |
| Kidney | publications with SAA and Kidney |
| Lung | publications with SAA and Lung |
| Intestine | publications with SAA and Intestine |
| Adipose Tissue | publications with SAA and Adipose Tissue |
| Muscle | publications with SAA and Muscle |
| Mammary Gland | publications with SAA and Mammary Gland |
| Eye | publications with SAA and Eye |
| Stomach | publications with SAA and Stomach |
| Pancreas | publications with SAA and Pancreas |
