CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Heparanasa |
|---|---|
| Sinónimo | HPA; HPR1; HPSE1; HSE1; Endo-glucoronidase; |
| Tipo de ensayo | Sándwich |
| Reactividad | Ratón |
| Rango | 15.6-1000pg/mL |
| Sensibilidad | 6.1pg/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 100μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó HPSE de ratón en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para HPSE de Ratón. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para HPSE de Ratón y un conjugado de Avidina-Peroxidasa de Rábano Picante (HRP) se añaden sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen HPSE de Ratón, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de Avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de HPSE de Ratón. Puede calcular la concentración de HPSE de Ratón en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO
DATOS TÍPICOS
Ratón HPSE Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (pg/mL) | 47.76 | 122.75 | 353.21 | 47.11 | 119.14 | 335.76 |
| Desviación estándar | 3.32 | 6.9 | 11.13 | 3.15 | 5.6 | 11.62 |
| CV(%) | 6.95 | 5.62 | 3.15 | 6.69 | 4.7 | 3.46 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Ratón HPSE adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 85-97 | 92 |
| Plasma EDTA (n=8) | 92-105 | 98 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 85-97 | 91 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Ratón HPSE en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Products associated with HPA ELISA Kits
| GPC3 ELISA Kit | publications with HPA and GPC3 |
| HSPG2 ELISA Kit | publications with HPA and HSPG2 |
| SDC1 ELISA Kit | publications with HPA and SDC1 |
Pathways associated with HPA ELISA Kit
| Defective B3GAT3 Causes JDSSDHD Pathway | Defective B3GAT3 Causes JDSSDHD Pathway |
| Defective B4GALT1 Causes B4GALT1-CDG (CDG-2d) Pathway | Defective B4GALT1 Causes B4GALT1-CDG (CDG-2d) Pathway |
| Defective B4GALT7 Causes EDS, Progeroid Type Pathway | Defective B4GALT7 Causes EDS, Progeroid Type Pathway |
| Defective CHST14 Causes EDS, Musculocontractural Type Pathway | Defective CHST14 Causes EDS, Musculocontractural Type Pathway |
| Defective CHST3 Causes SEDCJD Pathway | Defective CHST3 Causes SEDCJD Pathway |
| Defective CHST6 Causes MCDC1 Pathway | Defective CHST6 Causes MCDC1 Pathway |
| Defective CHSY1 Causes TPBS Pathway | Defective CHSY1 Causes TPBS Pathway |
| Defective EXT1 Causes Exostoses 1, TRPS2 And CHDS Pathway | Defective EXT1 Causes Exostoses 1, TRPS2 And CHDS Pathway |
| Defective EXT2 Causes Exostoses 2 Pathway | Defective EXT2 Causes Exostoses 2 Pathway |
| Defective PAPSS2 Causes SEMD-PA Pathway | Defective PAPSS2 Causes SEMD-PA Pathway |
Diseases associated with HPA ELISA Kit
| Neoplasm Metastasis | publications with HPA and Neoplasm Metastasis |
| Inflammation | publications with HPA and Inflammation |
| Melanoma | publications with HPA and Melanoma |
| Neoplasm Invasiveness | publications with HPA and Neoplasm Invasiveness |
| Lung Neoplasms | publications with HPA and Lung Neoplasms |
| Breast Neoplasms | publications with HPA and Breast Neoplasms |
| Disease Models, Animal | publications with HPA and Disease Models, Animal |
| Carcinoma, Hepatocellular | publications with HPA and Carcinoma, Hepatocellular |
| Liver Neoplasms | publications with HPA and Liver Neoplasms |
| Kidney Diseases | publications with HPA and Kidney Diseases |
Organs/Tissues associated with HPA ELISA Kit
| Vascular | publications with HPA and Vascular |
| Bone | publications with HPA and Bone |
| Lung | publications with HPA and Lung |
| Brain | publications with HPA and Brain |
| Kidney | publications with HPA and Kidney |
| Lymph Node | publications with HPA and Lymph Node |
| Placenta | publications with HPA and Placenta |
| Nerve | publications with HPA and Nerve |
| Uterus | publications with HPA and Uterus |
| Stomach | publications with HPA and Stomach |
