CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Proteína priónica |
|---|---|
| Sinónimo | CD230; GSS; ASCR; CJD; PRIP; PrP; PrP2730; PrPc; Major prion protein; Creutzfeldt-Jakob Disease; Gerstmann-Strausler-Scheinker Syndrome; Fatal Familial Insomnia |
| Tipo de ensayo | Sándwich |
| Reactividad | Humano |
| Rango | 0.15-10ng/mL |
| Sensibilidad | 0.06ng/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 100μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó PRNP humano en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio Sandwich-ELISA. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con un anticuerpo específico para PRNP Humana. Los estándares o muestras se añaden a los pocillos de la microplaca ELISA y se combinan con el anticuerpo específico. Luego, un anticuerpo de detección biotinilado específico para PRNP Humana y un conjugado de Avidina-Peroxidasa de Rábano Picante (HRP) se añaden sucesivamente a cada pocillo de la microplaca y se incuban. Los componentes libres se lavan. La solución de sustrato se añade a cada pocillo. Solo los pocillos que contienen PRNP Humana, anticuerpo de detección biotinilado y conjugado de Avidina-HRP aparecerán de color azul. La reacción enzima-sustrato finaliza mediante la adición de la solución de parada y el color se vuelve amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. El valor de DO es proporcional a la concentración de PRNP Humana. Puede calcular la concentración de PRNP Humana en las muestras comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO
DATOS TÍPICOS
Humano PRNP Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (ng/mL) | 0.47 | 1.53 | 4.31 | 0.5 | 1.63 | 4.17 |
| Desviación estándar | 0.03 | 0.07 | 0.16 | 0.03 | 0.07 | 0.16 |
| CV(%) | 6.07 | 4.56 | 3.77 | 6.38 | 4.55 | 3.86 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Humano PRNP adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 86-99 | 93 |
| Plasma EDTA (n=8) | 85-96 | 91 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 85-101 | 92 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Humano PRNP en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Products associated with PRNP ELISA Kits
| APP ELISA Kit | publications with PRNP and APP |
| GFAP ELISA Kit | publications with PRNP and GFAP |
| STIP1 ELISA Kit | publications with PRNP and STIP1 |
| BCL2 ELISA Kit | publications with PRNP and BCL2 |
| RPSA ELISA Kit | publications with PRNP and RPSA |
| NCAM1 ELISA Kit | publications with PRNP and NCAM1 |
Pathways associated with PRNP ELISA Kit
| Axon Guidance Pathway | Axon Guidance Pathway |
| Copper Homeostasis Pathway | Copper Homeostasis Pathway |
| Developmental Biology Pathway | Developmental Biology Pathway |
| Glypican 1 Network Pathway | Glypican 1 Network Pathway |
| NCAM Signaling For Neurite Out-growth Pathway | NCAM Signaling For Neurite Out-growth Pathway |
| NCAM1 Interactions Pathway | NCAM1 Interactions Pathway |
| Prion Diseases Pathway | Prion Diseases Pathway |
Diseases associated with PRNP ELISA Kit
| Prion Diseases | publications with PRNP and Prion Diseases |
| Nervous System Diseases | publications with PRNP and Nervous System Diseases |
| Creutzfeldt-Jakob Syndrome | publications with PRNP and Creutzfeldt-Jakob Syndrome |
| Scrapie | publications with PRNP and Scrapie |
| Gerstmann-Straussler-Scheinker Disease | publications with PRNP and Gerstmann-Straussler-Scheinker Disease |
| Alzheimer Disease | publications with PRNP and Alzheimer Disease |
| Insomnia, Fatal Familial | publications with PRNP and Insomnia, Fatal Familial |
| Disease Models, Animal | publications with PRNP and Disease Models, Animal |
| Nerve Degeneration | publications with PRNP and Nerve Degeneration |
| Memory Disorders | publications with PRNP and Memory Disorders |
Organs/Tissues associated with PRNP ELISA Kit
| Brain | publications with PRNP and Brain |
| Blood | publications with PRNP and Blood |
| Nerve | publications with PRNP and Nerve |
| Ganglia | publications with PRNP and Ganglia |
| Muscle | publications with PRNP and Muscle |
| Lymph Node | publications with PRNP and Lymph Node |
| Bone | publications with PRNP and Bone |
| Heart | publications with PRNP and Heart |
| Testis | publications with PRNP and Testis |
| Vascular | publications with PRNP and Vascular |
