CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES
| Nombre completo | Polipéptido amiloide de los islotes |
|---|---|
| Sinónimo | DAP;IAP;Amylin; |
| Tipo de ensayo | Competitivo |
| Reactividad | Humano |
| Rango | 62.5-4000pg/mL |
| Sensibilidad | 37.5pg/mL |
| Tipo de muestra | Suero, plasma y otros fluidos biológicos |
| Volumen de muestra | 50μL |
| Longitud de onda de detección | OD450 |
| Temperatura de transporte | 2-8°C |
| Especificidad | El kit detectó IAPP humana en las muestras y no se encontraron reacciones significativas entre especies. |
| Microplaca | 96-wells plate breakable into 12 x 8 wells strip |
PRINCIPIO DEL ENSAYO
| Este kit ELISA utiliza el principio de ELISA competitivo. La microplaca ELISA proporcionada en este kit ha sido pre-recubierta con IAPP humana. Durante la reacción, la IAPP humana en la muestra o estándar compite con una cantidad fija de IAPP humana en el soporte de fase sólida por los sitios en el anticuerpo de detección biotinilado específico para IAPP humana. El exceso de conjugado y la muestra o estándar no unido se eliminan por lavado, y el conjugado de avidina-peroxidasa de rábano picante (HRP) se agrega a cada pocillo de la microplaca y se incuba. Luego, se agrega una solución de sustrato TMB a cada pocillo. La reacción enzima-sustrato finaliza con la adición de la solución de parada y el color vira de azul a amarillo. La densidad óptica (DO) se mide espectrofotométricamente a una longitud de onda de 450 nm ± 2 nm. La concentración de IAPP humana en las muestras analizadas se puede calcular comparando la DO de las muestras con la curva estándar. |
COMPONENTES DEL KIT ELISA
Al recibirlo, desempacar rápidamente y almacenar según lo recomendado en las instrucciones.
| Componentes | Especificaciones | Almacenamiento y notas |
|---|---|---|
| Microplaca | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Devolverlo a la bolsa de papel aluminio y sellarla, almacenar a -20°C. |
| Estándar de referencia | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses Por favor, utilice estándares recién disueltos para cada experimento. Deseche cualquier estándar no utilizado después de la disolución. |
| Concentrado de anticuerpo de detección biotinilado (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C, 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Concentrado de conjugado HRP (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | No abierto: -20°C (Proteger de la luz), 12 meses No utilizado: Por favor, sellar el concentrado y almacenarlo a -20°C, y desechar la solución de trabajo. |
| Diluyente de anticuerpo de detección biotinilado | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de conjugado HRP | 14mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Diluyente de estándar de referencia y muestra | 20mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Concentrado de tampón de lavado (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12 meses |
| Reactivo sustrato (TMB) | 10mL×1 | 2-8°C (Proteger de la luz), 12 meses |
| Solución de parada | 7mL×1 | 2-8°C/Temperatura ambiente |
PROCEDIMIENTOS DEL ENSAYO
DATOS TÍPICOS
Humano IAPP Curva estándar ELISA
Los datos típicos son solo para referencia y las curvas deben volver a trazarse para cada experimento. Se recomienda la función logística para el ajuste.
PRECISIÓN
Precisión intra-ensayo (Precisión dentro de un ensayo): Se probaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intra-ensayo.
Precisión inter-ensayo (Precisión entre ensayos): Se probaron tres muestras de concentración conocida en veinte ensayos separados para evaluar la precisión inter-ensayo. Los ensayos fueron realizados por al menos tres técnicos utilizando dos lotes de componentes.
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Muestra | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Media (pg/mL) | 183.7 | 518.67 | 1463.15 | 166.73 | 504.94 | 1387.04 |
| Desviación estándar | 11.39 | 25.93 | 48.28 | 8.97 | 23.08 | 56.18 |
| CV(%) | 6.2 | 5 | 3.3 | 5.38 | 4.57 | 4.05 |
RECUPERACIÓN
Se evaluó la recuperación de Humano IAPP adicionado en tres niveles diferentes en muestras a lo largo del rango del ensayo en varias matrices.
| Tipo de muestra | Rango (%) | Recuperación promedio (%) |
|---|---|---|
| Suero(n=8) | 85-97 | 92 |
| Plasma EDTA (n=8) | 95-108 | 101 |
| Medio de cultivo celular (n=8) | 85-99 | 92 |
LINEALIDAD
Para evaluar la linealidad del ensayo, las muestras que contenían y/o estaban adicionadas con altas concentraciones de Humano IAPP en varias matrices se diluyeron con el diluyente de estándar de referencia y muestra para producir muestras con valores dentro del rango dinámico del ensayo.
Products associated with IAPP ELISA Kits
| INS ELISA Kit | publications with IAPP and INS |
| SCT ELISA Kit | publications with IAPP and SCT |
| RAMP3 ELISA Kit | publications with IAPP and RAMP3 |
| TTR ELISA Kit | publications with IAPP and TTR |
| ADM ELISA Kit | publications with IAPP and ADM |
| GCG ELISA Kit | publications with IAPP and GCG |
| CALCA ELISA Kit | publications with IAPP and CALCA |
| CALCR ELISA Kit | publications with IAPP and CALCR |
Pathways associated with IAPP ELISA Kit
| Amyloids Pathway | Amyloids Pathway |
| Calcitonin-like Ligand Receptors Pathway | Calcitonin-like Ligand Receptors Pathway |
| Class B/2 (Secretin Family Receptors) Pathway | Class B/2 (Secretin Family Receptors) Pathway |
| Developmental Biology Pathway | Developmental Biology Pathway |
| Disease Pathway | Disease Pathway |
| G Alpha (s) Signalling Events Pathway | G Alpha (s) Signalling Events Pathway |
| GPCR Downstream Signaling Pathway | GPCR Downstream Signaling Pathway |
| GPCR Ligand Binding Pathway | GPCR Ligand Binding Pathway |
| Integrated Pancreatic Cancer Pathway | Integrated Pancreatic Cancer Pathway |
| Maturity Onset Diabetes Of The Young Pathway | Maturity Onset Diabetes Of The Young Pathway |
Diseases associated with IAPP ELISA Kit
| Diabetes Mellitus | publications with IAPP and Diabetes Mellitus |
| Diabetes Mellitus, Type 2 | publications with IAPP and Diabetes Mellitus, Type 2 |
| Hyperglycemia | publications with IAPP and Hyperglycemia |
| Hyperinsulinism | publications with IAPP and Hyperinsulinism |
| Diabetes Mellitus, Experimental | publications with IAPP and Diabetes Mellitus, Experimental |
| Drug Toxicity | publications with IAPP and Drug Toxicity |
| Ulcer | publications with IAPP and Ulcer |
| Hypertension | publications with IAPP and Hypertension |
| Inflammation | publications with IAPP and Inflammation |
| Kidney Diseases | publications with IAPP and Kidney Diseases |
Organs/Tissues associated with IAPP ELISA Kit
| Pancreas | publications with IAPP and Pancreas |
| Connective Tissue | publications with IAPP and Connective Tissue |
| Mixed | publications with IAPP and Mixed |
| Testis | publications with IAPP and Testis |
