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¿Por qué el DAB es inicialmente incoloro? ¿Por qué se vuelve definitivamente azul tras la catálisis? ¿Por qué detener la reacción específicamente lo convierte en amarillo? Hoy, dejaremos de lado las fórmulas oscuras y descompondremos los principios completos de la reacción del desarrollo del color del TMB de una manera fácil de entender, revelando la esencia química detrás de los fenómenos experimentales.

Actualmente, las ficobiliproteínas se han convertido en sistemas de marcado fluorescente irremplazables para la citometría en flujo, el inmunoensayo multiplexado, la inmunohistoquímica y las plataformas de ensayos inmunológicos, siendo la ficoeritrina (PE) y la aloficocianina (APC) las más utilizadas.

La tecnología de marcado con fluorescencia es una de las herramientas de visualización más importantes en la investigación moderna de ciencias de la vida. Desde la localización intracelular de proteínas y el monitoreo de la expresión génica hasta la clasificación de células inmunes, el análisis multiparamétrico por flujo y la investigación en biología espacial, las señales fluorescentes son casi omnipresentes a lo largo del flujo experimental de las ciencias de la vida.

Hemos realizado extensos ensayos de tinción TSA multiplex en muestras parafinadas en nuestro trabajo diario, hemos identificado muchas trampas y desarrollado un protocolo experimental estable. A continuación, resumimos y compartimos nuestra experiencia práctica, esperando ayudar a todos a evitar desviaciones y mejorar las tasas de éxito experimental.

El estudio utilizó la tecnología de inmunohistoquímica multiplexa de inmunofluorescencia para analizar sistemáticamente las características del microambiente inmune tumoral en CCH con diferentes niveles de expresión de GPC3, con el objetivo de aclarar el valor predictivo de eficacia de GPC3 y proporcionar soporte teórico para optimizar estrategias de inmunoterapia combinada individualizada para CCH.

Para investigadores en biología, medicina y ciencias farmacéuticas, tres técnicas de detección inmunológica son prácticamente inevitables: ELISA, Western Blot (WB) e Inmunofluorescencia (IF). Estas tres técnicas, basadas en el principio central del reconocimiento específico antígeno-anticuerpo, constituyen métodos fundamentales para la detección de expresión proteica, análisis cualitativo y cuantitativo de muestras, así como análisis de localización molecular, abarcando todo el flujo de trabajo de experimentos celulares, detección tisular, cribado de fármacos y validación de muestras clínicas.

Este artículo le guiará a través de los pasos fundamentales de un proyecto de mIH desde secciones crudas hasta figuras de revistas de primer nivel, ayudándole a comprender exhaustivamente la lógica de investigación y el valor aplicativo del mIH.

Para comprender verdaderamente los tumores y optimizar la investigación y el tratamiento del cáncer, el primer paso es identificar los componentes celulares fundamentales del microambiente tumoral. Esto es exactamente por lo que la tecnología de inmunohistoquímica multiplex (mIHC) se ha convertido en la herramienta central para la investigación de tumores.

Este estudio confirmó sistemáticamente mediante imagen de inmunofluorescencia multiplex de célula simple y análisis estadístico multidimensional que el perfilado combinado de marcadores múltiples de células T presenta ventajas clínicas significativas en comparación con la detección tradicional de un solo marcador, resolviendo exitosamente el desafío de la estratificación pronóstica para pacientes con cáncer colorrectal de estadio III que reciben quimioterapia FOLFOX.

Publicado en Advanced Science, esta investigación fue realizada por los equipos de Min Zhou y Danni Zhong del Primer Hospital Afiliado a la Facultad de Medicina de la Universidad Zhejiang. Construyeron una plataforma sinérgica CV@PA-gel dirigida al colon y aclararon su mecanismo para intervenir la comorbilidad intestino-cerebro en la enfermedad inflamatoria intestinal (EII): el tratamiento con CV@PA-gel, una intervención novedosa, segura y efectiva, puede mantener la integridad de la barrera intestinal y reducir la translocación de la microbiota intestinal, bloquear adicionalmente la transformación inducida por microglía en astrocitos tipo A1 y, finalmente, aliviar los comportamientos depresivos y las disfunciones cognitivas inducidos por DSS.